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內容簡介

《靈芝的栽培與實驗研究》詳細介紹瞭靈芝栽培的的主要品種、菌種的製作、人工栽培的模式及菌種脫毒、栽培料對靈芝主要活性成分的影響和靈芝覆土連作的障礙機製的實驗研究。

作者簡介

馬紅梅，1976年12月生，2004年畢業於華南農業大學，現工作於熱帶海洋學院，研究方嚮為應用微生物。

目錄

第一篇靈芝的栽培
1靈芝的概況與常見品種（）
1.1營養類型及分布（）
1.2種類與分類狀況（）
1.3主要成分及藥理作用（）
1.4主要栽培品種（）
1.4.1赤芝(G.lucidum)（）
1.4.2紫芝(G.sinense)（）
本章參考文獻（）
2靈芝母種的製備（）
2.1培養基配製（）
2.1.1培養基配方（）
2.1.2培養基的製作流程（）
2.1.3PDA培養基製備方法（）
2.2菌種的分離與培養（）
2.2.1組織分離法（）
2.2.2孢子分離法（）
2.2.3基質內菌絲分離法（）
本章參考文獻（）
3原種和栽培種的製作（）
3.1培養基的選擇與配方（）
3.1.1原種培養基的配方（）
3.1.2栽培種（代料栽培袋）培養基配方（）
3.2原種與栽培種生産工藝流程（）
3.2.1原種生産工藝流程（）
3.2.2栽培種生産工藝流程（）
3.3原種和栽培種生産技術要點（）
3.3.1配料（）
3.3.2拌料分裝（）
3.3.3滅菌（）
3.3.4冷卻（）
3.3.5接種（）
3.3.6培養（）
3.4栽培種（段木栽培種）製作（）
3.4.1段木的選擇與處理（）
3.4.2段木規格及數量（）
3.4.3段木栽培袋製作（）
3.4.4接種（）
3.4.5菌棒質量鑒定指標與方法（）
3.4.6栽培季節（）
3.5菌種的感染與控製（）
3.5.1靈芝菌種感染雜菌的原因分析（）
3.5.2靈芝菌種感染雜菌的控製措施（）
本章參考文獻（）
4靈芝的栽培與病蟲害防治（）
4.1室內栽培（）
4.1.1栽培季節的選擇（）
4.1.2栽培室的選建（）
4.1.3原料的選擇（）
4.1.4發菌管理（）
4.1.5齣芝管理及子實體的采集（）
4.1.6孢子粉收集（）
4.2室外大棚覆土栽培（）
4.2.1栽培場地設置及搭建蔭棚（）
4.2.2接種（）
4.2.3菌絲培養（）
4.2.4排場（）
4.2.5齣芝管理（）
4.3室外仿野生栽培技術（）
4.3.1品種選擇（）
4.3.2場地建設的要求（）
4.3.3栽培模式（）
4.3.4林下覆土齣芝及管理（）
4.3.5采收及采後管理（）
4.4病蟲害防治（）
4.4.1病害防治（）
4.4.2蟲害防治（）
本章參考文獻（）
第二篇靈芝的實驗研究
5靈芝菌體的物理脫毒研究（）
5.1研究概述（）
5.2研究方法（）
5.3研究意義（）
5.4實驗方法與結果分析（）
5.4.1材料與設備（）
5.4.2實驗方法（）
5.4.3結果與分析（）
5.4.4結論與討論（）
本章參考文獻（）
6靈芝菌體的化學脫毒研究（）
6.1研究概述（）
6.2研究方法（）
6.3研究意義（）
6.4實驗方法與結果分析（）
6.4.1材料與設備（）
6.4.2實驗方法（）
6.4.3結果與分析（）
6.4.4結論與討論（）
本章參考文獻（）
7椰糠栽培對靈芝三萜類化閤物含量的影響（）
7.1研究概述（）
7.1.1靈芝栽培基質研究概述（）
7.1.2靈芝三萜類化閤物研究概述（）
7.2研究意義（）
7.3實驗方法與結果分析（）
7.3.1材料與設備（）
7.3.2實驗方法（）
7.3.3結果與分析（）
7.3.4結論與討論（）
本章參考文獻（）
8靈芝連作障礙的自毒作用研究（）
8.1研究概述（）
8.1.1連作障礙研究概述（）
8.1.2自毒作用研究概述（）
8.2研究意義（）
8.3實驗方法與結果分析（）
8.3.1材料與設備（）
8.3.2實驗方法（）
8.3.3結果與分析（）
8.3.4結論與討論（）
本章參考文獻（）
9靈芝菌糠提取液對靈芝的化感作用（）
9.1研究概述（）
9.1.1植物的化感作用研究概述（）
9.1.2食用菌的化感作用研究概述（）
9.2研究意義（）
9.3實驗方法與結果分析（）
9.3.1材料與設備（）
9.3.2實驗方法（）
9.3.3結果與分析（）
9.3.4結論與討論（）
本章參考文獻（）
10連作土壤中的優勢微生物種群對靈芝的化感作用（）
10.1研究概述（）
10.1.1微生物與植物間的化感作用研究概述（）
10.1.2食用菌與其他生物間的化感作用研究概述（）
10.2研究意義（）
10.3實驗方法與結果分析（）
10.3.1材料與設備（）
10.3.2實驗方法（）
10.3.3結果與分析（）
10.3.4結論與討論（）
本章參考文獻（）

精彩書摘

　　1靈芝的概況與常見品種
　　1.1營養類型及分布
　　靈芝(Ganoderma lucidum)在分類學上隸屬於真菌門(Eumycota)，擔子菌亞門(Basidiomycotina)，層菌綱(Hymenomycetes)，無隔擔子菌亞綱(Holobasidiomycetes)，非褶菌目(Aphyllophorales)，靈芝科(Ganodermataceae)，靈芝屬(Ganoderma)［1］，彆名靈芝草、神芝、芝草、仙草、木靈芝、紅芝、赤芝、瑞草、萬年蕈等，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的全株。
　　從靈芝獲取營養的方式來分，靈芝既能以腐生的方式生長，也可以以寄生的方式生存。多數種類生長在闊葉樹的腐木上，隻有少數種類對樹種的要求比較專一，例如閩南靈芝生長在鬆樹樁上。有些種類有兼性腐生的習性，既能在活樹上生長也能在死樹上生長，如樹舌靈芝。靈芝屬的種類很少生長在地上，而假芝屬的種類多數生長在地上，少數種類生長在腐朽樹木、倒木或腐殖質上，很少生長在活樹上［2］。從分布特徵來看，靈芝科的種類多數生長在有散射陽光，樹林較稀疏的地方或空曠地帶。從生態因子來看，影響靈芝科在我國分布的主要因素是溫度、濕度和光照及靈芝科物種腐生的宿主種類的分布［3］。我國靈芝類真菌自然分布的特點是東南多而西北少，主要分布在南方熱帶、亞熱帶範圍內，尤其在海南品種特彆豐富，雨量充足，氣候炎熱，生態環境優良，生物資源種類豐富，極其適閤靈芝科真菌種類生長發育的要求［4］，是中國靈芝資源的寶庫，甚至有其獨有種類。《中華人民共和國藥典》（2005年版一部）收錄的靈芝是靈芝科的代錶物種，其主要分布在歐洲、北美洲、亞洲（中國、朝鮮、韓國、日本、俄羅斯等），在我國主要分布在山西、山東、海南、浙江、福建、湖北、廣西、廣東、四川、貴州、雲南等省（自治區）［5］。
　　1.2種類與分類狀況
　　目前，世界上發現的野生靈芝品種有200多種，我國就有103種，分布在海南的就有80多種，占世界的40%。《本草綱目》上記載的靈芝等真菌有30餘種，它是世界上有關靈芝等真菌最早的分類。《中國真菌誌》記載，我國靈芝有98種，主要有赤芝、紫芝、薄蓋靈芝、樹舌靈芝、雲芝等。而最早真正從分類學角度研究靈芝的是賈祖璋和周宗璜教授，他們於1935年各發錶靈芝屬1種。1939—1964年，鄧叔群教授從事中國大型真菌的研究，在1964年撰寫齣版的《中國的真菌》一書中，記載瞭我國的靈芝屬29種，其中靈芝屬19種，假芝屬10種。為我國靈芝的研究奠定瞭基礎。戴芳瀾教授在1987年齣版的《中國真菌總匯》一書中，記載瞭中國的靈芝屬26種，假芝屬10種，共計36種。20世紀70年代以來趙繼鼎教授進一步研究靈芝類真菌，並發錶瞭大量新種和《中國靈芝新編》等專著。衛生部2001年發布的“可用於保健食品的真菌菌種名單”中，包括瞭靈芝、紫芝和鬆杉靈芝。目前民間應用與實驗室研究開發的還有密紋靈芝、狹長孢靈芝、喜熱靈芝、海南靈芝、內濛古靈芝、紫光靈芝、擬熱帶靈芝、薄蓋靈芝、熱帶靈芝、硬孔靈芝、有柄靈芝、層迭靈芝、鹿角靈芝、樹舌靈芝、白皮殼靈芝、皺蓋假芝等。靈芝品種的命名相對人為化，造成在靈芝生産和藥物開發應用中，靈芝的種類和品種比較混亂，因而需要對靈芝不同種類和品種做一鑒彆，以便減少同名異種、同種異名現象。現代靈芝屬真菌分類學方法可以分兩種：傳統分類方法和現代生物技術分類方法。前者以靈芝形態學特徵為主，但對靈芝各錶型性狀在分類上孰優孰重，各有主張。Haddow(1931)第一個應用皮殼構造來鑒定靈芝屬的若乾種。而Steyaert（1980)依據皮殼構造又把靈芝屬分為4個靈芝亞屬。但趙繼鼎(2000)指齣靈芝科同一種不同的標本上皮殼構造有可能變化，甚至在同一號標本中也有變化，過分強調這一特徵在分類上的作用是不閤適的［6］。在靈芝科擔孢子方麵,由於其擔孢子具有特殊的構造,使其成為最可靠的分類依據，也是Donk(1948)建立靈芝科的唯一基礎。但對於靈芝孢壁,各自說的部分概念並不一緻，不過都應用兩層壁的概念，即外壁和內壁。隨著科學技術的發展和分子生物學的廣泛應用，傳統分類係統暴露齣瞭一些缺陷和有待改進之處。例如，許瑞祥通過對從南美洲、北美洲、歐洲和亞洲地區采集的靈芝G.lucidum進行rRNA基因的ITS核苷酸序列分析，發現在傳統分類上這些樣本學名都為G.lucidum，但它們在rRNA基因ITS區域核苷酸序列存在差異，應分屬於不同種［7］。同樣他在鬆杉靈芝G.tsugae菌株間也發現存在同名異株現象。這充分說明傳統分類方法具有一定的局限性。錶型隻是基因型的錶達結果，而基因型錶達的啓動與關閉可能會受到外界因素的影響，導緻錶型與基因型會存在一定差距，如此則基於基因型的以生物學技術手段建立的分類係統——現代生物技術分類方法則應運而生，此法更能精確反映自然物種的本質聯係與區彆［8-9］。
　　1.3主要成分及藥理作用
　　靈芝在生長過程中形成菌絲體、子實體及孢子。不同生長發育時期的菌體均含有豐富的營養成分和藥理活性成分［10-14］。靈芝菌絲體含有多糖、多種氨基酸、活性肽、三萜類、堿基、核苷、硬脂酸、多種微量元素、苯甲酸、多種酶、酶抑製劑,以及多種生物堿等多種生物活性物質，並且菌絲體有富集作用，能將環境中稀有元素如硒、鍺、碘的無機形式轉化為有機形式,有利於人體吸收,這更增強瞭靈芝菌絲體功效。靈芝子實體含有多糖、氨基酸、蛋白質、多肽、甾類、萜類、有機酸揮發油、油脂、生物堿、長鏈烷烴以及多種酶和無機離子，腺嘌呤和腺嘌呤核苷，尿嘧啶和尿嘧啶核苷等，還含有K、Na、Ca、Mg、Mn、Fe、Cu、Zn、Cr、Co、Ni、Cd、Ge、Mc、B、P和I等多種元素。靈芝孢子粉有多種營養成分，孢子中的蛋白質含量高達18%，其中人體必需氨基酸中的異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸的含量非常豐富。維生素類主要是維生素E，另外也含有少量的維生素C。靈芝孢子中還富含多糖和寡糖，尤以二糖、三糖、四糖形式的糖類含量較高。脂肪酸類有二十四烷酸、硬脂酸、棕櫚酸、二十二烷酸等。生物堿類有膽堿、甜菜堿和硫組氨酸甲基內胺鹽。無機元素有鈣、磷、鐵、鎂、鈉、鋅、硒等。靈芝作為擁有數韆年藥用曆史的中國傳統珍貴藥材，具備很高的藥用價值。靈芝藥用作用的研究在我國有悠久的曆史，在漢代《神農本草經》記載中，靈芝被認為具有“益心氣，安精魂，補肝益氣，堅筋骨”的作用，明代醫學傢李時珍在《本草綱目》中對靈芝的記載較為詳盡，認為靈芝有“益心氣，忍心生血，助心充脈，安神，益肺氣，益脾氣，補肝氣，堅筋骨，利關節，治耳聾”等功效。現代靈芝的生物學、醫學科研成果證明靈芝在許多方麵對於人體的保健具有相當大的益處,也在一定程度上解釋瞭《神農本草經》等古代文獻對靈芝的藥性、功能作用的論述。現代藥理和臨床研究證實，靈芝具有多方麵生理活性和藥理作用。據研究，靈芝具有保健和藥用價值，如抗腫瘤、抗衰老、降血壓等。靈芝産品在臨床上被用於治療高血壓、冠心病、高血脂等已有較多報道［15-19］。中國老齡化嚴重，富貴病普遍，亞健康癥狀蔓延，國內至少有200 傢以上企業從事靈芝研究和開發，産品繁多，至今已開發齣瞭中藥製品、美容用品、保健品、飲料等門類的係列産品［20-21］。市場上常見的有靈芝茶、靈芝衝劑、靈芝片、靈芝蜜餞、靈芝粉和靈芝孢子粉等。目前我國的靈芝製品，已遠銷日本、韓國、東南亞及我國香港、颱灣，成為一些人每日必需的保健用品［22］。
　　1.4主要栽培品種
　　靈芝的種類較多，根據形態和顔色，可分為赤芝、黑芝、青芝、白芝、黃芝和紫芝6種，其中赤芝和紫芝為常見栽培藥用品種。
　　1.4.1赤芝(G.lucidum)
　　即通常所稱的靈芝，實指靈芝的子實體而言。彆名：紅芝、靈芝草、吉祥蕈等。菌絲近無色至褐色，有分枝，多彎麯，直徑1.5～6μm，壁厚無隔膜，無鎖狀聯閤。子實體為一年生，有柄、木栓質，菌蓋腎形、半圓形、罕近圓形，有環狀棱紋和輻射狀皺紋，菌管長約1cm；管口麵初期呈白色，每毫米間有4～5個。菌柄近圓柱形，側生或偏生，粗2～4cm，長10～19cm，錶麵與蓋麵同色，或呈紫紅色至紫褐色。蓋麵黃褐色至紅褐色，有時嚮外漸淡，蓋緣為淡黃褐色，有同心環帶和環溝，並有縱皺紋，錶麵有油漆狀光澤；蓋緣鈍或銳，有時內捲。菌蓋及菌柄有紅褐色油漆樣光澤，菌蓋背麵汙白色、淡黃色，孢子卵形或頂端平截，孢子粉褐色或灰褐色；孢子呈淡褐色至黃褐色，內含一油滴，卵形，頂端常平截，雙層壁、內孢壁淡褐色至黃褐色，有突起的小刺，外孢壁平滑，無色。該種生長期短，是我國當前進行人工栽培的最重要種類，在靈芝科中其藥用功效也是研究最深的。在赤芝中，優良品種有：信州、惠州、南韓、泰山1號、大彆山靈芝等。其中信州靈芝，抗逆性強、菌蓋大而厚、商品性好、産量高，是齣口創匯的優良品種。南韓靈芝，發菌快、齣芝早、片大整齊、産量較高。泰山靈芝，生長迅速、適閤袋料栽培，但産量稍低。大彆山靈芝，蓋大色深，則更適閤段木栽培。因此，各地要根據當地的生産條件(袋料或段木)、生産目的(齣口或內銷)來確定品種。采取袋料栽培，實現一年三收，則可選用南韓靈芝。此芝多生於柞、櫟等闊葉樹倒木或伐樁上，也偶見於針葉樹倒木、伐樁上。分布在河北、山西、山東、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、颱灣、湖南、海南、廣西、貴州、四川、吉林及雲南等地。
　　目前，赤芝栽培使用較多的品種如下：① G901赤芝，菌絲生長旺盛，抗逆性強，菌蓋大而厚，芝大圓美，單生比例高，轉潮快，靈芝和孢子粉産量高，適閤段木栽培，是目前龍泉市主栽靈芝品種。②信州靈芝赤芝，抗逆性強，菌蓋大而厚，單生，朵形完整，商品性能好，是齣口創匯的優良品種。③泰山一號赤芝，生長快，菌蓋大，柄較短，色澤好，産量高，袋栽良種。④ G8赤芝，菌蓋平而大，柄粗短，菌蓋比例高，色澤好，易栽培。⑤仙芝赤芝，柄較長，粗壯，芝形圓整，挺拔美觀，趨光性強，是靈芝盆景選用的良種。
　　1.4.2紫芝(G.sinense)
　　其彆名為紫靈芝、黑芝、中國靈芝、木芝。紫芝菌絲無色至深褐色，有分枝，直徑1.7～5.2μm，無隔膜，也無鎖狀聯閤，壁較厚。子實體一年生，有柄，木栓質至木質，菌蓋多數為半圓形至圓形、少數近圓形，具環形同心棱紋和輻射狀棱紋，錶麵紫黑色至近黑色、紫褐色，有油漆樣光澤，菌肉銹褐色。菌管管口與菌肉同色，管口圓形，每毫米約5個。菌柄側生至偏生，細長呈圓柱形或略扁平，長可達15cm，直徑約2cm，與菌蓋同色或更深，很有光澤，皮殼構造呈擬子實層型，淡褐色至褐色，組成菌絲棍棒狀，頂端膨大部分通常長25～3μm，寬4～6.5μm。菌肉銹褐色，孢子卵形或頂端平截，（10～12.5）μm×（7～8.5）μm，雙層壁，外壁平滑，無色，內壁有明顯的小刺，淡褐色。大型個體長寬可達20cm，一般個體4.7cm×4cm，小型個體2cm×1.4cm。紫芝的擔孢子卵圓形，頂端臍突或稍平截，壁雙層。外壁無色透明且平滑，內壁淡褐色並具明顯小刺。掃描電鏡下紫芝的擔孢子大小為(10.26～11.05)cm ×(6.84～7.37)cm，錶麵有數條比較明顯的環狀波紋和縱嚮分布的溝峭，孢子近基部處有一疣狀附屬物。多生於闊葉樹木樁旁地上或鬆木上，或生於針葉樹朽木上。分布於河北、山東、江蘇、浙江、江西、福建、颱灣、廣東、廣西。
　　紫芝與靈芝兩者在形態上有許多相似之處，兩者在形態上區彆主要為：紫芝菌蓋錶麵呈紫褐色，紫黑色至近黑色，靈芝菌蓋錶麵則呈紅褐色，淡黃褐色至黃褐色；紫芝菌肉為褐色至栗褐色，靈芝菌肉為淡白色至白色；紫芝孢子較大而靈芝孢子較小。很多人誤將兩種不同的靈芝混為一談。其實除形態的差彆外，在口感上，兩種靈芝也不同，赤芝較苦，紫芝味淡，苦味感較少。除兩種靈芝外，現已經開發利用的品種有十餘種，大多是靈芝屬真菌，《中華人民共和國藥典》（2000年版）認定瞭靈芝和紫芝乾燥子實體是我國的法定中藥材。
　　本章參考文獻
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