內容簡介
本書主要介紹細胞工程的理論與技術,內容涉及動物細胞工程和植物細胞工程,主要分為三篇:一篇介紹細胞工程的基本技術基礎,包括細胞培養的基本設施、基本條件、基本方法、基本技術等;第二篇介紹動物細胞工程,包括細胞培養、細胞融閤與單剋隆抗體、胚胎工程、乾細胞與組織工程、核移植技術與動物剋隆、轉基因動物與動物生物反應器、動物染色體工程等內容;第三篇介紹植物細胞工程,包括植物組織培養、植物的快速繁殖與植物脫毒、體外單倍體誘導與單倍體育種、植物胚胎培養、體細胞胚胎發生和人工種子、原生質體融閤、植物染色體工程、植物轉基因技術等。為瞭方便學習,教材配有內容提要、思考題、實驗和相關網站。
本書是生物技術和生物工程專業的專業教材,也可供生物科學、醫學、農學、林學及其他與生命科學相關的專業的學生和科研技術人員參考。
內頁插圖
目錄
緒論
0.1 細胞工程簡介
0.2 細胞工程的發展史
思考題
第一篇 細胞工程的技術基礎
第1章 細胞培養的設施與基本條件
1.1 細胞工程實驗設置
1.2 常用儀器與設備
1.3 實驗室的生物安全
思考題
第2章 清洗與消毒
2.1 清洗
2.2 消毒
2.3 思考題
思考題
附實驗1 器械的清洗與消毒
第3章 細胞培養的基本方法
3.1 無菌操作技術
3.2 培養細胞的觀察
3.3 細胞培養中常用的染色方法
3.4 細胞培養的汙染和檢測
思考題
第二篇 動物細胞工程
第4章 細胞培養
4.1 培養細胞的生物學特徵
4.2 細胞培養液
4.3 細胞的基本培養技術
4.4 細胞係和細胞株的建立
4.5 細胞的凍存、復蘇和運輸
思考題
附實驗2 細胞培養液的配製
實驗3 原代細胞培養
實驗4 培養細胞的增殖及活力測定
實驗5 細胞的傳代培養
實驗6 細胞的凍存和復蘇
第5章 細胞融閤與單剋隆抗體
5.1 單剋隆抗體技術
5.2 人源性單剋隆抗體製備
5.3 單剋隆抗體在醫學上的應用
思考題
附
實驗7 動物細胞融閤
第6章 胚胎工程
6.1 胚胎發育的基本過程和機製
6.2 體外受精
6.3 胚胎移植技術
6.4 胚胎分割技術
6.5 早期胚胎的體外培養
6.6 胚胎冷凍保存技術
6.7 動物的性彆控製
思考題
附
實驗8 哺乳動物體外受精和早期胚胎的體外培養
第7章 乾細胞與組織工程
7.1 胚胎乾細胞
7.1.1 胚胎乾細胞的研究概況
7.1.2 胚胎乾細胞的生物學特性
7.1.3 胚胎乾細胞的建係
7.1.4 ES細胞的鑒定
7.1.5 ES細胞的應用前景及麵臨的難題
7.2 成體乾細胞
7.2.1 造血乾細胞
7.2.2 神經乾細胞
7.2.3 胰島乾細胞
7.2.4 皮膚乾細胞
7.3 組織工程
7.3.1 組織工程化皮膚
7.3.2 組織工程化骨骼
7.3.3 組織工程化血管
7.3.4 組織工程化管狀器官
7.3.5 組織工程化腺體器官
思考題
第8章 核移植技術與動物剋隆
8.1 核移植技術
8.1.1 核移植技術的類型
8.1.2 核移植技術的一般操作程序
8.2 核移植技術的應用
8.2.1 核移植技術的應用
8.2.2 核移植技術存在的問題
思考題
附實驗9 魚類核移植實驗
實驗10 哺乳類細胞核移植實驗
第9章 轉基因動物與動物生物反應器
9.1 轉基因動物的培育技術
9.1.1 基因顯微注射法
9.1.2 逆轉錄病毒感染法
9.1.3 胚胎乾細胞介導法
9.1.4 精子載體導入法
9.1.5 YAC介導的基因轉移
9.1.6 細胞核移植技術
9.2 轉基因動物的應用
9.2.1 改良動物品種
9.2.2 生物製藥
9.2.3 建立診斷和治療人類疾病的動物模型
9.2.4 生産可用於人體器官移植的動物器官
9.2.5 基因治療
9.2.6 基因打靶
9.2.7 轉基因動物應用麵臨的問題
9.3 動物乳腺生物反應器
9.3.1 動物乳腺生物反應器的製備
……
第三篇 植物細胞工程
精彩書摘
第1章 細胞培養的設施與基本條件
生物體內的細胞可以通過機體的調節、代謝和保護等機製而使其營養、環境、生長條件、抵抗有害因子能力等方麵處於最佳狀況。而體外培養的細胞由於失去瞭對整體的依賴性,對實驗室細胞培養的設施條件和人員素質提齣瞭較高的要求。細胞培養是一項在體外長期進行的頻繁操作工作,所用的培養基非常適閤於微生物生長,所以預防培養細胞受到汙染是細胞培養成功與否的關鍵。為瞭最大限度地創造既適閤於細胞生長又可防止汙染的環境,在培養過程中對細胞培養的設施、操作規程和檢測方法等都製定瞭嚴格的規範要求。
1.1 細胞工程實驗室的設置
1.1.1 動物細胞工程實驗室的設置
動物細胞工程實驗室要求嚴格保持無菌環境,避免微生物及其他有害因素的影響。一般來講,它應能進行六方麵的工作:無菌操作、培養、製備、清洗、消毒滅菌處理和儲藏。各區最好分彆設置於相連的各個房間,特彆是無菌操作室最好能單獨設置。如都安置在一大實驗室內,則無菌操作區與清洗、消毒滅菌區應分彆位於兩端,而製備、儲藏和培養區位於此兩區之間。
前言/序言
細胞工程與基因工程、微生物工程和酶工程等構成瞭現代生物技術,是生物技術和生物工程專業的骨乾課程。由於生物技術和生物工程專業曆史較短,教材建設尚處於起步階段。近年來雖已有多本教材麵世,但多數都有學科偏嚮,將動物細胞工程和植物細胞工程這兩大部分內容綜閤在一起的教材較少,這就對學生全麵學習和掌握細胞工程帶來瞭不便。無論是動物細胞工程,還是植物細胞工程,都是以細胞生物學為理論基礎,具有相同的技術基礎。在學科發展過程中,這兩部分內容密不可分,在研究思想上相互啓發,在研究方法上相互藉鑒,閤在一起進行介紹和學習,不僅節約時間,還有助於學生分析、比較和綜閤能力的培養。基於上述考慮,本書將動物細胞工程和植物細胞工程綜閤起來編寫。本書內容主要分為三部分:第一篇介紹細胞工程的基本技術基礎,也就是動物細胞工程和植物細胞工程都需要的基本技術,包括細胞培養的基本設施、基本條件、基本方法、基本技術等;第二篇介紹動物細胞工程,包括細胞培養、細胞融閤與單剋隆抗體、胚胎工程、乾細胞與組織工程、核移植技術與動物剋隆、轉基因動物與動物生物反應器、動物染色體工程等內容;第三篇介紹植物細胞工程,包括植物組織培養、植物的快速繁殖與植物脫毒、體外單倍體誘導與單倍體育種、植物胚胎培養、體細胞胚胎發生和人工種子、原生質體融閤、植物染色體工程、植物轉基因技術等。本書的編寫力求突齣三個特色。一是內容處理上既要考慮到動物細胞工程與植物細胞工程的相通性與綜閤性,又要承認它們的特殊性。它們在理論基礎和技術基礎上有許多相同或相似的地方,但是由於動物細胞和植物細胞在結構上的差異,使得研究技術與手段在許多方麵又有著截然的不同,教條地生拉硬靠在一起就會造成不倫不類。第一篇主要體現瞭它們的一緻性,第二和第三篇體現其特殊性。二是內容編寫上既考慮到教材的基礎性,又考慮到學科發展的先進性。細胞工程是本科生的專業課程,需要提供給學生最基本的知識和技術,但又是發展最為迅速的學科,知識更新周期短,技術創新速度快。編寫中選取基本的技術和原理進行係統的介紹,對學科的最新發展力求有所反映,在思考題中特彆要求學生對學科進展要及時追蹤,還嚮學生推薦瞭相關網站,提供瞭本書的專門網頁,使學生能得到最新的資料,獲得及時的幫助。書中設有專門的實驗進行技術訓練和研究實踐,幫助學生加深對學科知識的理解,掌握實驗技術的要領,培養創新意識和創新能力。三是內容設置上既考慮到教材的理論性和係統性,又考慮到本教材的特殊性和實用性。細胞工程是在學習生物化學、細胞生物學、胚胎學和發育生物學等課程的基礎上開設的,因此,沒有必要將這些課程內容進行全麵復述。本書僅是在每篇開篇集中介紹與本部分緊密相關的基礎理論知識,使學習者對研究與實驗的原理有比較清晰的瞭解和比較全麵的把握。細胞工程畢竟是一個應用性學科,是一門技術性很強的課程,大部分內容是對技術的描述和方法的介紹。我們在教學實踐中體會到,實驗內容緊跟教材內容安排比較實用,可以減少大量的內容重復,有助於學生對所學內容從理論到技術有比較及時和全麵的瞭解。本書編寫曆時近兩載,期間得到瞭不少同事和朋友的關心和幫助。科學齣版社和山東師範大學及各位作者所在學校給予瞭很大的支持,並得到瞭山東省改革試點專業——生物科學(師範類)專項經費的資助,參閱瞭國內外同行的大量資料,在此一並緻謝。
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