内容简介
《药用植物组培快繁实务》根据现代植物组织培养技术理论和方法,阐述了药用植物在组织培养工厂化快速繁殖育苗技术的应用技能与研究开发方法。以项目为载体,以能力培养为核心,以实务案例教学为主线。编排了28个实务案例,包括药用植物组织培养实验室规划设计、培养基设计与配制、药用植物离体组织培养的技术、药用植物无病毒苗的培育、药用植物组培技术研发、药用植物组培苗快繁工厂化生产技术。分门别类介绍常用药用植物的根和根茎类药材、草本类药材、木本类药材的组织快繁技术,供同学们实验、实训时参考。在突出能力培养同时,强调理论知识的应用性和生产实践行知培养,编排了药用植物组培技术研发,为学有余力的学生进一步深入学习研究开发组培相关技术奠定基础。
《药用植物组培快繁实务》适用于中、高等职业院校中的生物技术、生物科学、农学、林学、园艺、中药材栽培等生物相关专业教材,也可供从事组培相关生产经营管理、技术员工培训教材及中药材种植人员参考。
内页插图
目录
前言
绪论
项目一 药用植物组织培养实验室规划设计
任务1 实验室规划与设计
任务2 实验室常用仪器、器皿及器械的使用与管理
任务3 案例
【思考与练习】
项目二 培养基设计与配制
任务1 植物组织培养基的种类
任务2 植物组织培养基的选择
任务3 植物组织培养基的制备
任务4 案例
【思考与练习】
项目三 药用植物离体组织培养的技术
任务1 灭菌技术
任务2 材料的选择与消毒
任务3 试管苗接种
任务4 试管苗培养
任务5 试管苗的启动与增殖培养
任务6 试管苗壮苗与生根培养
任务7 试管苗炼苗与假植
任务8 试管苗移栽
任务9 案例
【思考与练习】
项目四 药用植物无病毒苗的培育
任务1 热处理脱毒
任务2 茎尖培养脱毒
任务3 其他途径脱毒
任务4 病毒植物的鉴定
任务5 无病毒植物的保存和利用
任务6 案例
【思考与练习】
项目五 药用植物组培技术研发
任务1 组培快繁研究的技术路线
任务2 组培试验的设计方法
任务3 组培试验方案的制订
任务4 组培试验成果观察与数据调查
任务5 组培试验结果分析
任务6 案例
【思考与练习】
项目六 药用植物组培苗快繁工厂化生产
任务1 工厂化生产基地规划与设计
任务2 工厂化生产的设施、设备、器材
任务3 组培快繁工厂化的生产技术
任务4 组培快繁工厂化生产的经营管理
【思考与练习】
项目七 常用药用植物组织培养技术
任务1 根和根茎类药材的组织培养技术
案例1 百合药用植物组织培养技术
案例2 黄连药用植物组织培养技术
案例3 人参的组培快繁技术
案例4 怀山药的组培快繁技术
案例5 黄花白芨组培快繁技术
案例6 多花黄精组培快繁技术
任务2 草本类药材的组织培养技术
案例1 台湾金线莲组织培养技术
案例2 库拉索芦荟的组培快繁技术
案例3 丹参的组培快繁技术
案例4 铁皮石斛的组培快繁技术
案例5 菊花组培快繁技术
任务3 木本类药材的组织培养技术
案例1 金银花的组培快繁技术
案例2 罗汉果的组培快繁技术
案例3 黄花倒水莲组培快繁技术
案例4 贯叶连翘组培快繁技术
案例5 远志组培快繁技术
案例6 枸杞的组培快繁技术
【思考与练习】
附录
附录一 常用培养基配方
附录二 培养物的不良表现、可能原因及改进措施
附录三 蒸汽压力与蒸汽温度对应表
附录四 乙醇稀释,稀酸、稀碱的配制方法
附录五 常见抗生素的配制和贮存
附录六 常见植物激素的配制和贮存
附录七 植物组织培养中常用的消毒剂
附录八 常用植物生长激素浓度单位换算表
参考文献
彩图
精彩书摘
(七)培养材料的支持物及其他添加物
1.培养材料的支持物
除旋转和振荡培养外,为使培养材料在培养基上固定生长,要外加一些支持物。
目前,琼脂是一种极为理想的支持物。它是从海藻中提取的多糖类物质,它不是培养基中的必需成分,只是作为一种凝固胶粘剂使培养基变成固体或半固体状态,以支持培养物。虽然琼脂只是一种胶状物。但由于其生产方式和厂家不同而可能含有数量和种类不等的杂质,如Ca、Mg、Fe、硫酸盐等,从而可能影响到培养效果或试验结果。在选择琼脂时,最好购买固定厂家的优质商品。琼脂的使用浓度取决于培养目的、使用的琼脂性能(胨力张度、灰分、热水中不溶物、粗蛋白等)等因素,一般浓度为0.4%~1%,质量越差的琼脂用最越大。除琼脂外,为了更好地调控培养物的生长,现在发展的趋势是使用一种含有琼脂的混合物作为固体胶粘剂。如Sigma公司生产的Agargel就是用琼脂和Phytagl混合在一起的一种新型胶粘剂,可以用来控制培养物的玻璃化。如果经济条件允许,建议使用新型混合物来代替琼脂,可能会使试验获得更为理想的结果。
培养基中添加琼脂使培养基呈固体或半固体状态,使培养物能够处于表面,既能吸收必需的养分、水分,又不致因缺氧而死亡。但固体或半固体状态,一方面限制了培养基中营养成分和水的移动,另一方面也限制了培养的植物组织分泌物特别是有毒代谢产物的扩散,使培养物周围的营养成分逐渐匮乏,代谢产物逐渐积累,植物生长受阻或受到毒害。为了解决这个问题,人们试验使用其他支持物来代替琼脂。滤纸桥法即是一种,该法是将一张较厚的滤纸折叠成M型,放入液体培养基中,将培养的植物组织放在M的中间凹陷处,这样培养物可通过滤纸的虹吸作用不断吸收营养和水分。又可保证有足够的氧气。在此基础上,又发展出了一种类似于“看护”培养的方法,即在滤纸桥的中间凹陷处加一种固体培养基,固体培养基中也可混有分散的植物细胞团,将材料放在固体培养基上,再把滤纸放入另一种液体培养基中,用两种不同的培养基同时培养材料,可收到较好的效果。现在也有用玻璃纤维滤器或人工合成的聚酯羊毛代替滤纸的报道,并获得了成功。从滤纸、玻璃纤维滤器和聚酯羊毛代替琼脂的试验中人们或许能受到一些启发,即培养基中添加琼脂的目的主要是为了支持培养物,只要达到这个目的,可选用不同的材料和方法来进行代替琼脂的试验。需要考虑的主要问题是,这种材料必须无毒害作用,且不被培养的植物组织所吸收,不与培养液成分发生化学反应。
琼脂作为支持物或凝固剂对绝大部分植物都是有利或者无害的,但也有一些报道表明琼脂对某些培养物不利。在马铃薯、胡萝卜、烟草、小麦等作物组培中,均发现以淀粉代替琼脂更有利于培养物的生长和分化。
2.活性炭(AC)
活性炭能从培养基中吸附许多有机物和无机物分子,它可以清除培养的植物组织在代谢过程中产生的对培养物有不良或毒副作用的物质,也可以调节激素的供应。也许是由于活性炭的存在使培养基变黑,产生了类似于土壤的效果,以利于植物的生长。还有报道指出,活性炭有刺激胚胎发生或组织生长和形态发生的作用。活性炭来源的不同也可能使它所起的作用不同,如木材活性炭比骨质活性炭含有更多的碳,而骨质活性炭中含有的混合物可能对培养物有副作用。活性炭的一般用量为0.5%~3%。
(八)抗生物质
培养的植物组织很容易发生细菌或真菌污染。引起的原因是多方面的,有的是消毒不彻底,有的是无菌操作过程中器皿或操作人员不注意,有的是培养过程中由于培养容器的盖子破损或没扎紧,有的是培养的植物组织内部携带有病原物。污染常给组培工作带来很大影响或损失,尤其是已经培养一段时间的材料再发生污染所造成的损失更大。为了解决或防止这个问题,可在配置培养液时添加抗生素,如加200~300U的庆大霉素可使细菌污染受到很好的控制。浓度超过600U时可在一定程度上抑制分化。但这种抑制作用可在除去庆大霉素后一段时间内得到恢复。
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前言/序言
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