內容簡介
《分子剋隆實驗指南(精編版)》作為一本準確、可靠、明晰的實驗操作手冊,獲得廣泛的贊譽,已成為分子生物學工作者必備的案頭工具書。
第三版在前兩版的基礎上對圖書內容進行徹底的更新,修改瞭每一個方案,增加瞭大量的新內容,拓寬瞭學科範圍,涵蓋瞭各類常規技術、成熟技術和新技術,這些實驗技術都是目前世界範圍內分離、分析和剋隆DNA分子很好實驗室日常工作中經常用到的。
精編版專為實驗颱邊的工作者設計,對於遺傳學、分子生物學、細胞生物學、發育生物學、神經科學和免疫學專業的學生具有無與倫比的價值,同時給單個研究者提供瞭“一書在手、方案全覽”的便利。
目錄
第1章 分子剋隆中使用的質粒載體的製備
方案1.1 SDS堿裂解法製備質粒DNA:小量製備
方案1.2 SDS堿裂解法製備質粒DNA:中量製備
方案1.3 SDS堿裂解法製備質粒DNA:大量製備
方案1.4 煮沸法小量製備質粒DNA
方案1.5 煮沸法大量製備質粒DNA
方案1.6 用牙簽挑取菌落小量製備質粒DNA
方案1.7 SDS裂解法製備質粒DNA
方案1.8 聚乙二醇沉澱法純化質粒DNA
方案1.9 層析法純化質粒DNA
方案1.10 氯化銫�蹭寤�乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA:連續梯度法
方案1.11 氯化銫�蹭寤�乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA:不連續梯度法
方案1.12 有機溶劑萃取法從DNA中去除溴化乙錠
方案1.13 離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠
方案1.14 NaCl離心法去除質粒DNA樣品中的小片段核酸
方案1.15 Sephacryl S��1000層析法去除質粒DNA樣品中的小片段核酸
方案1.16 氯化鋰沉澱法去除質粒DNA樣品中的小片段核酸
方案1.17 在質粒載體中進行定嚮剋隆
方案1.18 在黏性末端上連接接頭
方案1.19 在質粒載體中進行平末端剋隆
方案1.20 質粒DNA的去磷酸化
方案1.21 平末端DNA連接閤成的接頭
方案1.22 在低熔點瓊脂糖中連接質粒和目的DNA
方案1.23 製備和轉化大腸杆菌感受態的Hanahan 方法:高效的轉化 方法
方案1.24 製備和轉化感受態大腸杆菌的Inoue 方法:超級感受態細胞
方案1.25 氯化鈣製備大腸杆菌感受態
方案1.26 大腸杆菌的電轉化
方案1.27 用X�瞘al和IPTG篩選細菌剋隆:α互補
方案1.28 小量細菌剋隆的雜交篩選
方案1.29 中量細菌剋隆的雜交篩選
方案1.30 大量菌落的雜交篩選
方案1.31 菌落的裂解和DNA與濾膜的結閤
方案1.32 在濾膜上進行細菌DNA的雜交
第2章 λ噬菌體及其載體
方案2.1 λ噬菌體的平闆培養
方案2.2 λ噬菌體噬菌斑的挑取
方案2.3 通過平闆裂解和洗脫製備λ噬菌體原種
方案2.4 用小量液體培養製備λ噬菌體原種
方案2.5 λ噬菌體的大規模培養:低倍數感染
方案2.6 從大規模裂解物中沉澱λ噬菌體顆粒
方案2.7 通過凝膠電泳測定λ噬菌體原種和裂解物中DNA的含量
方案2.8 通過CsCl等密度梯度離心純化λ噬菌體顆粒
方案2.9 通過甘油分 級梯度離心純化λ噬菌體顆粒
方案2.10 通過沉澱/離心純化λ噬菌體顆粒
方案2.11 用蛋白酶K和SDS從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA
方案2.12 用甲酰胺從大規模培養物中提取λ噬菌體DNA
方案2.13 用作剋隆載體的經單一限製性酶切割的λ噬菌體DNA的製備
方案2.14 用作剋隆載體的雙限製性酶切割的λ噬菌體DNA的製備83
方案2.15 λ噬菌體載體DNA的堿性磷酸酶處理
方案2.16 λ噬菌體臂的純化:通過蔗糖密度梯度離心
方案2.17 用於基因組文庫中的真核DNA的部分 酶切:預反應
方案2.18 用於基因組文庫的真核DNA的部分 酶切: 製備反應
方案2.19 λ噬菌體臂與外源DNA片段的連接
方案2.20 基因組文庫的擴增
方案2.21 噬菌體DNA從噬菌斑轉移到濾膜98
方案2.22 噬菌體DNA在濾膜上的雜交
方案2.23 λ噬菌體快速分 析:從平闆裂解物中純化λDNA
方案2.24 λ噬菌體分 離物的快速分 析:從液體培養物中純化λDNA
第3章 M13噬菌體載體
第4章 高容量載體的應用
第5章 DNA凝膠電泳和脈衝場瓊脂糖凝膠電泳
第6章 真核基因組DNA的製備和分 析
第7章 真核細胞mRNA的提取、純化和分 析
第8章 聚閤酶鏈反應體外擴增DNA
第9章 放射性標記DNA探針與RNA探針的製備
第10章 人工閤成的寡核苷酸探針
第11章 cDNA文庫製備及基因鑒定
第12章 DNA測序
第13章 誘變
第14章 錶達文庫的篩選
第15章 剋隆基因在大腸杆菌中的錶達
第16章 剋隆基因轉入培養的哺乳動物細胞
第17章 哺乳動物細胞基因錶達分 析
第18章 蛋白質相互作用研究技術
附錄
索引
前言/序言
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