内容简介
《微生物学实验教程系列:真菌生物学实验教程/普通高等教育“十二五”规划教材》由中国农业大学组织编写,汇集了各位参编教师多年教学积累的素材,并根据当前教学实际需要编写而成。
《微生物学实验教程系列:真菌生物学实验教程/普通高等教育“十二五”规划教材》选择了代表性真菌的形态、生理、遗传学研究的特点,向读者展示了真菌(包括卵菌、黏菌)的多样性,以及当前对于它们形态、生态、生理生化、遗传学研究的技术,包括菌株的分离、纯化和鉴定,细胞的生长与发育,细胞自噬现象的检测,细胞DNA和RNA的快速提取及检测,真菌突变体构建的策略,外源基因在真菌中的表达及目的蛋白的分析等。同时收集了中国农业大学在真菌学实验教学中积累的与本实验教程密切相关的示范图例、录像和学名发音带读录音等配套的资料,见科学出版社教学服务网站。
《微生物学实验教程系列:真菌生物学实验教程/普通高等教育“十二五”规划教材》可供理、工、农、医学及师范类院校生物学专业本科生、研究生使用,也可作为微生物学及相关领域研究人员的参考书。
内页插图
目录
总序
前言
实验一 壶菌纲、卵菌纲代表菌形态特征观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验内容及步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:半永久装片的制作方法
实验二 接合菌门真菌的鉴定
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验内容及步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:培养水玉霉图示
实验三 子囊菌门代表菌形态特征观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验内容及步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:真菌的石蜡制片技术流程
实验四 担子菌门代表菌的形态特征观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验内容及步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:冷冻切片实验流程及注意事项
实验五 半知菌类代表菌形态特征观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验内容及步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:扫描电子显微镜样品制作及观察丝状真菌
实验六 黏菌基本形态特征的观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:几种黏菌属种描述,请在体视显微镜下观察所提供的标本
黏菌子实体图例
实验七 丝状真菌细胞核的DAPI染色及观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:荧光显微镜简介及使用步骤
实验八 酿酒酵母原生质体制备与再生
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
附:几种细菌过滤器及其使用
实验九 稻巨座壳菌自噬体的显微观察
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十 氧化胁迫诱导白假丝酵母细胞凋亡的荧光检测
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十一 丝状真菌疏水蛋白的分离提取和检测
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十二 丝状真菌DNA快速提取及其18SrDNA序列测定
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十三 丝状真菌总RNA及mRNA的提取与检测
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十四 细菌源耐热木聚糖酶基因在黑曲霉中的表达
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十五 脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达与目的蛋白检测
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十六 真核细胞表达异源蛋白的糖基化修饰及检测
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料及试剂
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十七 多拷贝异源基因重组表达体系的构建及其qPCR检测
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附:实时荧光定量PCR仪图示及其基本技术原理详解
实验十八 采用重叠PCR技术敲除粟酒裂殖酵母Clr4基因
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验十九 利用细菌CRISPR/Cas系统敲除酿酒酵母目的基因
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
实验二十 粗糙脉孢菌双基因缺失突变体的构建及双基因的遗传互作分析
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料
四、实验步骤
五、实验报告(作业)
六、思考题
七、参考文献
附录1 常用培养基配方及染色液
附录2 安斯沃思(Ainsworth.1973)的分类系统
附录3 真菌词典第八版(1995年)的分类体系
附录4 真菌词典第九版(2001年)的分类体系
附录5 真菌词典第十版(2008年)的分类体系
附录6 互动实验室设备使用原则及方法(学生端的使用)
附录7 真菌常用网站
附录8 常用真菌学名列表
附录9 真菌图例
附录10 黏菌子实体图例
附录11 实验七和实验十彩图
前言/序言
真菌是地球生物圈中仅次于动物和植物的第三大类真核生物。无论是在人类探索生命的奥秘中还是在解决人类可持续发展的重大问题中,真菌像动植物一样是不可或缺的极为宝贵的自然资源。当今世界生物信息技术高速发展,学科之间的交叉已成为必然的发展趋势,由此而产生的新技术的问世为生物学家揭示生命本质的研究提供了良好的机遇。1996年,在欧洲、美国、加拿大和日本共96个实验室的633位科学家通力协作下,第一个真核生物酿酒酵母的基因组测序完成,由此开创了生物基因组学的新纪元,也为深入研究真菌的生物学特性及促进医疗卫生、工业、农业、环境保护及能源开发等多个领域的发展带来了不竭动力。真菌作为真核生物的原始代表被推向生物技术的前沿,面对这种挑战,我国的真菌学科需要追赶国际先进水平,培养高层次创造型人才和产生高水平科研成果是真菌学科发展的关键。
为改变当前各院校真菌实验教学的松散状况,中国农业大学与南开大学等5所高校教师合作,本着宽口径、厚基础、着力培养人才的创新意识,提高创新思维能力,共同编写了《真菌生物学实验教程》-书。为我国真菌学科的教学发展做出了应有的努力,为培养我国真菌学科的优秀人才打下了坚实的实验技术基础,为通往真菌的神秘世界架起一座桥梁是本书编写者的共同心愿。
本书采用现代真菌研究的技术原理和方法,以真菌的形态分类、生理代谢及遗传变异的典型实验作为选材的指导思想,既强调了不同研究方法的理论意义,又详细描述了操作步骤,并对关键步骤做了重点提示,对主要设备原理及使用方法进行了简要说明。每个实验都提出问题供读者思考和讨论。本书还提供了目前公认并常用的真菌分类体系。中国高等真菌学科的开拓者和中国黏菌研究的奠基人、著名植物病理学家、教育家周宗璜教授生前无偿赠予的黏菌子实体标本,我们已珍藏多年,借这次编写实验教程的机会,将部分黏菌拍摄成图片展现给读者。
本书选图有些由本课程教师和学生自行拍摄,除特殊说明外,还引用了《菌物学概论》(2002)、《半知菌图谱》(1980)等书的图例,已在书中说明。本教程实验一~实验六由李颖、田杰生编写,实验七由张国珍编写,实验八、实验十二、实验十五~实验十七由李颖编写,实验九~实验十一由李明春编写,实验十三、实验十四由张金祥编写,实验十八由王瑜编写,实验十九由梁连铭编写;实验二十由胡启文编写;一些模式真菌切片图和黏菌照片由田杰生和中国农业大学生物学院本科生李凝箫、孙嫒等拍摄,全书由李颖和李明春统筹整理,由邢来君教授主审。此外,本书配备的附加文件中还收集了本科生邓斯文、吴家曦、李妍、刘建新、张倩和韩宇明等同学自行分离和鉴定所得到的菌株信息、图片,有张一语同学自行培养及拍摄的水霉游动孢子录像,有典型真菌学名发音带读录音(见科学出版社教学服务网站www.sciencep.com)。
本书的撰写得到了中国农业大学生物学院“教育部高等学校专业综合改革试点”项目的资助;感谢现在法国工作的MorrisCindy博士、PhilippeNicot博士和中国农业大学生物学院微生物及免疫学系王贺祥教授以标准纯正的英语和中文发音带读真菌学名;感谢中国农业大学电子显微镜室贾君镇老师和光学显微镜室周海鹰老师、梁丽萍老师分别提供了扫描电镜和冷冻切片样品的制备方法及图片;感谢科学出版社给予的全力支持与帮助。在此也向为本书编写提供实验材料和参加预试的中国农业大学生物学院博士研究生关菲菲、王贵利、黄金金、王旭及南开大学博士研究生喻其林和硕士研究生丁晓慧表示衷心感谢!
我们希望把教学中所用的资料信息提供给指导教师和学生,然而限于作者水平,仍然存在不足之处,望广大读者提出批评和建议,以便本书再版时做出修订。
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